1933年1-5月，日军先后占领了热河、察哈尔两省及河北省北部大部分土地，大约60万平方公里。进而进逼北平、天津，并于5月31日，迫使国民党政府签署了限令中国军队撤退的《塘沽协定》。

同年，日本成立“关东军防疫供水部”（即731细菌部队），后来扩大成一支大规模的细菌战部队。

该部队用中国人进行鼠疫、霍乱、梅毒等细菌以及毒气、枪弹等的活体试验，并大量制造鼠疫、霍乱等各种细菌，用飞机播撒在中国各地，残害中国人民。