因为PCR产物中还有没有反应掉的ddNTP、金属离子、Taq酶.尤其是金属离子,对连接的干扰作用较大.
1、 去除带有荧光染料的残余ddNTP,不然会有染料峰的干扰
2、 去除残留的酶等蛋白质,因为蛋白质带有苯环,也会对荧光信号的检测带来干扰
3、 毛细管电泳时,要有buffer来保持稳定的离子强度和pH,所以还要再测序前去除盐离子。
原创 | 2022-10-12 02:08:54 |浏览:1.6万
因为PCR产物中还有没有反应掉的ddNTP、金属离子、Taq酶.尤其是金属离子,对连接的干扰作用较大.
1、 去除带有荧光染料的残余ddNTP,不然会有染料峰的干扰
2、 去除残留的酶等蛋白质,因为蛋白质带有苯环,也会对荧光信号的检测带来干扰
3、 毛细管电泳时,要有buffer来保持稳定的离子强度和pH,所以还要再测序前去除盐离子。