菌龄太老的话，细胞壁通透性变差，阳性菌也会被染成红色。 乙醇脱色后，阳性细菌和阴性细菌都是蓝色。 阳性颜色不一样是因为操作过程或实验室环境或其他原因会这样，但是阴性只有是红色或染色不够淡些

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察

阳性紫色阴性红色

染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。