原核DNA聚合酶III由多个亚基组成，是原核生物大肠杆菌染色体DNA复制的主要酶。该酶由核心酶和全酶两种形式，全酶由核心酶，滑动嵌和嵌载复合物组成，复制起始的时候需要滑动嵌锚地DNA并驱动酶的前进。

这种特殊的结构可以大大增加增加DNA复制的进行性。此酶具有5‘-3’的聚合酶活性和3‘-5’的外切酶活性。